牛病毒性腹泻/黏膜病毒抗体间接ELISA检测方法的建立

• 作者: 倪宏波 周玉龙 常敬伟 常春龙 李田田 毕莹 王士霞 邢思毅
• 来源期刊: 黑龙江八一农垦大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 牛病毒性腹泻病毒 E2蛋白 间接ELISA
• 年，卷（期）: 2016,（6）
• 所属期刊栏目: 牛场群发病防控
• 页码范围: 74-78
• 页数: 5页
• 分类号: S858.23
• 字数: 3834字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2090.2016.06.015

摘要

为建立一种检测牛病毒性腹泻、黏膜病病毒抗体的间接ELISA方法,利用昆虫细胞真核表达系统成功表达E2蛋白并纯化,使用纯化后的蛋白作为包被抗原.确定最佳抗原包被浓度为6 μg·mL-1,最佳血清稀释度为1∶80,最佳包被液为碳酸缓冲液,最佳盐封闭液为5％脱脂乳,最佳血清作用时间为60 min,酶标抗体作用最佳浓度为1∶10 000;最佳底物作用时间为5 min,阳性临界值为D450nm≥0.282.与IDEXX的BVDV间接ELISA试剂盒比较,总符合率为91.5％,板内和板间重复性试验变异系数均小于10％.该方法与牛副流感病毒Ⅲ型、牛传染性鼻气管炎病毒、牛呼吸道合胞体病毒和牛冠状病毒阳性血清无交叉反应.因此,该ELISA诊断方法可用于大批量样本抗体水平监测和流行病学调查.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周玉龙	黑龙江八一农垦大学动物科技学院	64	267	8.0	13.0
2	邢思毅	黑龙江八一农垦大学动物科技学院	8	15	2.0	3.0
3	常春龙	黑龙江八一农垦大学动物科技学院	10	13	2.0	3.0
4	李田田	黑龙江八一农垦大学动物科技学院	4	13	2.0	3.0
5	常敬伟	黑龙江八一农垦大学动物科技学院	8	13	2.0	3.0
6	毕莹	黑龙江八一农垦大学动物科技学院	12	20	3.0	3.0
7	王士霞	黑龙江八一农垦大学动物科技学院	6	11	2.0	3.0