CXCR4基因表达增强K562细胞的趋化作用

• 作者: 叶韵斌 周智锋 陈慧菁 陈淑萍
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 医学
• 关键词: 白血病 趋化因子受体 稳定表达 转移
• 年，卷（期）: 2008,（8）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 863-866
• 页数: 4页
• 分类号: R733.7
• 字数: 2309字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6325.2008.08.018

摘要

目的 构建高表达人CXCR4蛋白的白血病细胞系并测定CXCR4基因对其侵袭转移能力的影响.方法 从外周血淋巴细胞中提取基因组RNA,用RT-PCR扩展编码CXCR4基因片段,将CXCR4基因定向克隆到含有双启动子的真核表达载体PBudCFA.1,采用酶切和序列测定方法鉴定.将所构建的重组质粒用脂质体2000转染K562细胞,Zeoein筛选阳性克隆.流式细胞术和RT-PCR对阳性克隆进行鉴定;用Transwell板检测转染与未转染CXCR4的K562细胞对趋化因子SDF-1趋化活性.结果 成功构建编码CXCR4基因的真核表达质粒PBudCE4.1/CXCR4.经转染入K562细胞,筛选获得能稳定高表达人CXCR4蛋白的K562/CXCR4细胞;K562/CXCR4细胞对SDF-1的趋化能力较K562细胞明显增强.结论 成功构建了转染人CXCR4基因的白血病细胞系,为进一步研究白血病细胞髓外浸润的分子机制奠定基础.