血管内皮细胞生长因子的表达及其单克隆抗体的制备

• 作者: 刘敬 刘立成 徐静 李树香 王欣怡 许丽锋 邹检平
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 血管内皮细胞生长因子 表达 单克隆抗体 ELISA
• 年，卷（期）: 2008,（11）
• 所属期刊栏目: 诊断制品
• 页码范围: 1002-1005
• 页数: 4页
• 分类号: Q786 R392-33
• 字数: 2520字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-5503.2008.11.021

摘要

目的 表达、纯化血管内皮细胞生长因子(VEGF165)蛋白,并制备其单克隆抗体.方法 将pGEX-4T-1/VEGF165表达质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中,IPTG诱导表达GST-VEGF165融合蛋白,并采用十二烷基肌氨酸钠溶解,亲和层析纯化.用获得的GST-VEGF165蛋白免疫小鼠,制备抗GST-VEGF165单克隆抗体,并进行鉴定及初步应用.结果 表达的GST-VEGF165融合蛋白相对分子质量约为45 000,表达量约占菌体总蛋白的20%,纯化后蛋白纯度大于90%,并具有与其受体结合的活性,亲和力约为109L/mol.免疫小鼠后,获得1株抗GST-VEGF165的单克隆抗体,反应原性良好,亚类为IgG2a,解离常数为2×10-9mol/L.以此单抗为包被抗体,建它了双抗体夹心ELISA法,VEGF165的最佳检测范围为1.562 5～25 ng/ml.结论 成功表达、纯化了VEGF165蛋白,并制备出VEGF165单克隆抗体,为VEGF检测试剂盒的研制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	许丽锋	北京生物制品研究所免疫研究室	16	43	3.0	5.0
2	徐静	北京生物制品研究所免疫研究室	44	107	5.0	8.0
3	李树香	北京生物制品研究所免疫研究室	14	26	2.0	4.0
4	刘敬	北京生物制品研究所免疫研究室	11	22	2.0	4.0
5	王欣怡	北京生物制品研究所免疫研究室	11	22	2.0	4.0
6	刘立成		1	5	1.0	1.0
7	邹检平		1	5	1.0	1.0