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摘要:
目的:构建针对CHK(checkpoint kinase,细胞周期检测点激酶)1基因的短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA),观察其对高表达CHK1的宫颈癌细胞系-HeLa细胞凋亡和细胞周期的影响.方法:设计并合成了针对CHKI的shRNA,将其导入本室构建的携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的RNAi(RNA interference,RNA干扰)表达载体中.通过RT-PCR和Western blotting分别检测HeLa细胞CHKI基因和蛋白水平的表达,以流式细胞仪测细胞凋亡,MTT法检测细胞的增殖.结果:成功构建了携带EGFP的RNAi表达载体pEGFP-HI.与对照组和空载体转染组相比.shRNA使细胞中CHK1 mRNA水平下降了66%,蛋白水平下降了印%.此外,shRNA转染组的HeLa细胞凋亡率明显高于对照组,其增殖活性则明显低于对照组.结论:本课题构建的RNAi表达载体便于观察靶基凶的转染情况,且不影响H1启动子的体内转录.CHK1shRNA能诱导HeLa细胞凋亡,抑制该细胞的增殖,为进一步研究CHK1在肿瘤治疗中的作用机制提供了实验基础.
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文献信息
篇名 CHK1shRNA抑制HeLa细胞增殖并诱导其凋亡
来源期刊 中国病理生理杂志 学科 医学
关键词 检测点激酶1 RNA干扰 HeLa细胞 细胞凋亡
年,卷(期) 2008,(10) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 1891-1894
页数 4页 分类号 R347
字数 3472字 语种 中文
DOI 10.3321/j.issn:1000-4718.2008.10.005
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 邹萍 华中科技大学同济医学院附属协和医院血液病研究所 258 977 13.0 18.0
2 张敏 华中科技大学同济医学院附属协和医院血液病研究所 197 1492 20.0 32.0
3 游泳 华中科技大学同济医学院附属协和医院血液病研究所 75 267 8.0 11.0
4 陈智超 华中科技大学同济医学院附属协和医院血液病研究所 46 239 9.0 12.0
5 王海艳 三峡大学第一临床医学院宜昌市中心人民医院血液科 1 2 1.0 1.0
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研究主题发展历程
节点文献
检测点激酶1
RNA干扰
HeLa细胞
细胞凋亡
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中国病理生理杂志
月刊
1000-4718
44-1187/R
大16开
广东省广州市黄埔大道西601号
46-98
1985
chi
出版文献量(篇)
11461
总下载数(次)
3
总被引数(次)
84945
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:the National Natural Science Foundation of China
官方网址:http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:数理科学
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