H5N1亚型禽流感病毒血凝素(HA)基因的表达及纯化

• 作者: 张丽萍 张改平 朱礼倩 李清州 王丽 赵绪永 邓瑞广 郝惠芳
• 来源期刊: 河南农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 禽流感病毒 H5N1亚型 血凝素(HA) 原核表达
• 年，卷（期）: 2008,（8）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医
• 页码范围: 127-130
• 页数: 4页
• 分类号: S852.65+9.5
• 字数: 2423字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-3268.2008.08.035

摘要

利用PCR方法从含禽流感病毒HA基因的质粒T-HA上扩增HA基因,再将其克隆到原核表达载体pET28a中,用E.coli BL21(DE3)原核表达,SDS-PAGE和Western-blot对表达蛋白进行鉴定.Western-blot结果表明,表达产物具有免疫学活性,蛋白的分子量约为60kD,位于包涵体中.包涵体经变性、复性处理,表达蛋白能与H5亚型AIV阳性血清特异性反应,具有良好的抗原性.ELISA检测结果表明,用此纯化蛋白作为包被抗原检测H5N1亚型AIV血凝素抗体具有良好的灵敏性.