探讨生肌调节因子和连接蛋白43基因在大鼠成纤维细胞中的表达

• 作者: 刘中民 张文杰 张旭敏 汪进益 范慧敏
• 来源期刊: 中国实验诊断学
• 学科: 生物学
• 关键词: 生肌调节因子 连接蛋白43 基因转染 成纤维细胞 心力衰竭
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 285-289
• 页数: 5页
• 分类号: Q785
• 字数: 3240字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-4287.2008.03.001

摘要

目的 通过观察转染生肌调节因子(myoblast determination,MyoD)基因和连接蛋白43(Connexin)基因的大鼠真皮成纤维细胞(demal fibroblast,DFs)生物学功能的变化,探讨Myo和Cx43基因转染DFs细胞的意义.方法 采用Gateway技术,构建真核质粒表达载体,利用慢病毒(LV)表达系统,将大鼠MyoD cDNA和Cx43 cDNA转入大鼠成纤维细胞中,经Blasticidin筛选培养,通过RT-PCR,Western blot及膜片钳技术等方法检测MyoD及Cx43 mRNA及蛋白表达,并检测离子电流变化,通过显微镜观察转染后生长情况,免疫组织化学检测肌动蛋白和结蛋白的表达.结果 RT-PCR,Western blot检测出MyoD及Cx43的mRNA及相应蛋白表达,膜片钳检测到转染后钙离子电流,显微镜观察到基因转染筛选后,培养1周细胞的融合现象,并有多核肌管形成.免疫组织化学检测可见其下游蛋白Desmin及α-actin呈现阳性表达.结论 MyoD和Cx43基因转染使DFs分化为成肌细胞,为进一步研究基因治疗心力衰竭奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张文杰	吉林大学基础医学院生理教研室	92	474	10.0	18.0
2	范慧敏	同济大学附属东方医院心脏中心	139	378	8.0	12.0
3	刘中民	同济大学附属东方医院心脏中心	156	455	9.0	13.0
4	汪进益	同济大学附属东方医院心脏中心	43	131	6.0	8.0
5	张旭敏	同济大学附属东方医院心脏中心	10	35	4.0	5.0