DNA甲基化PCR方法的优化

• 作者: 俞媛 王玮 陈立军 马勇
• 来源期刊: 武警医学院学报
• 学科: 生物学
• 关键词: AFP基因 甲基化PCR 条件 优化
• 年，卷（期）: 2008,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1045-1047,1054
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 2493字
• 语种: 中文

摘要

[目的]优化DNA甲基化PCR的反应体系及扩增参数,为基因甲基化的研究建立一个最佳的PCR方法.[方法]以MHCC-97H肝癌细胞株AFP基因启动子区为模板,分析DNA甲基化反应体系中Mg2+、TaqDNA聚合酶用量、加入时间、退火温度及循环方式对甲基化PCR扩增的影响.[结果]反应体系20 μl:模板DNA(MoDNA),2 μl;正向引物,1 μl;反向引物,1 μl;10× PCR Buffer,2.5 μl;2 mmol/L dNTPs,2.5 μl;Taq酶,0.4 μl;MgCl2,2μl;H2O,8.6μl.PCR程序采用Touch Down PCR.[结论] 优化了适用于AFP基因甲基化PCR的反应体系,为利用甲基化PCR分析方法研究肝癌等肿瘤发生机制奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马勇	武警医学院科研部	23	88	5.0	8.0
2	陈立军	武警医学院生化教研室	55	268	10.0	14.0
3	王玮	武警医学院生化教研室	17	51	4.0	6.0
4	俞媛	天津市天和医院检验科	6	5	2.0	2.0