Smac基因过表达增强肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体诱导神经母细胞瘤细胞凋亡

• 作者: 周兆群 江涛 王晓榕 邵小松 陆超 陈辉
• 来源期刊: 实用儿科临床杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Smac 肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体 神经母细胞瘤 凋亡
• 年，卷（期）: 2008,（15）
• 所属期刊栏目: 血液/肿瘤疾病
• 页码范围: 1173-1175
• 页数: 3页
• 分类号: R729
• 字数: 3228字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-515X.2008.15.012

摘要

目的 研究Samc基因在肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)诱导的神经母细胞瘤(NB)SK-N-SH细胞凋亡中的增强作用.方法 1.利用反转录(RT)-PCR从人胚肾293细胞中扩增人Smac基因全长cDNA,通过TA克隆构建重组T载体pGEM-T/Smac.2.将目的 片段从重组T载体上酶切下来,构建真核细胞表达载体pcDNA3.1/Smac,并转染人NB SK-N-SH细胞.用新霉素G418筛选稳定细胞株SK-N-SH/Smac,并用Western blot鉴定Smac基因的过表达.3.用1 000μg/L的TRAIL作用于过表达Smac基因的SK-N-SH/Smac和普通的SK-N-SH细胞24 h.采用流式细胞分析检测细胞凋亡百分率.另设无TRAIL干预的SK-N-SH/Smac及正常SK-N-SH对照组.4.比色法测定各组细胞中caspase-8酶活性.结果 1.成功建立稳定过表达Smac基因的NB克隆株SK-N-SH/Smac.2.流式细胞分析显示1 000μg/L的TRAIL作用24 h后,过表达Smac基因的SK-N-SH细胞凋亡百分率显著高于正常对照的SK-N-SH细胞[(44.8±4.71)%vs(23.6±3.05)%P＜0.05].3.比色法测定显示,同样在1 000μg/L的TRAIL作用24 h,后,过表达Smac基因的SK-N-SH/Smac细胞中,caspase-8的酶活性显著高于未转染的普通SK-N-SH细胞[(0.743±0.029)vs(0.476±0.031)P＜0.05].结论 转染并过表达Smac基因可增强TRAIL对神经母细胞瘤SK-N-SH细胞的促凋亡作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	江涛	南京医科大学附属南京儿童医院急诊科	23	88	5.0	8.0
2	王晓榕	南京医科大学附属南京儿童医院急诊科	16	37	4.0	4.0
3	陆超	南京医科大学第一附属医院儿科	69	226	7.0	9.0
4	陈辉	南京医科大学第一附属医院儿科	24	120	6.0	9.0
5	邵小松	南京医科大学第一附属医院儿科	23	95	5.0	7.0
6	周兆群	南京医科大学附属南京儿童医院急诊科	13	30	3.0	5.0