大规模噬菌体DNA测序样品制备方法的改进与应用

• 作者: 冯国开 刘承武 刘靖华 姚琦 姜勇 杨敏 牛茂昌 袁利华
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: 噬菌体展示技术 DNA噬菌体 聚合酶链反应 淘选
• 年，卷（期）: 2008,（46）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 16-18
• 页数: 3页
• 分类号: R363.21
• 字数: 2537字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2008.46.006

摘要

目的 优化大规模噬菌体DNA测序样品制备的方法,提高筛选效率.方法 通过PCR扩增噬菌体环七肽库第一轮、第二轮和第三轮淘选产物中含插入目的片段噬菌体DNA,经琼脂糖凝胶电泳和DNA测序鉴定,并与经典的噬菌体DNA提取方法进行比较.结果 PCR扩增法和经典法制备的噬菌体DNA的测序成功率分别为92.73%、93.75%,差异无统计学意义(P>0.05);两种方法制备的同一个噬菌体克隆的DNA经测序鉴定显示测序结果一致;第一轮、第二轮和第三轮淘选产物的噬菌体克隆经PCR扩增和电泳鉴定,发现无插入目的片段的噬菌体克隆检出率逐轮增加分别为1.04%、4.17%和22.69%(P<0.01).结论 PCR扩增含插入目的片段噬菌体DNA的方法可使大规模噬菌体筛选和DNA测序更加方便、快捷、实用,值得推广.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姜勇		72	377	8.0	17.0
2	杨敏		45	177	8.0	10.0
3	刘靖华		19	146	5.0	12.0
4	姚琦		3	13	2.0	3.0
5	刘承武		3	11	2.0	3.0
6	冯国开		2	3	1.0	1.0
7	袁利华		1	3	1.0	1.0
8	牛茂昌		1	3	1.0	1.0