实时荧光RT-PCR快速检测蚊体内乙型脑炎病毒及福建省基因Ⅰ型乙型脑炎病毒的发现

• 作者: 师永霞 幸芦琴 李小波 洪烨 相大鹏 胡龙飞 郑夔 郭波旋 黄吉城
• 来源期刊: 中国卫生检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 实时荧光RT-PCR LNA探针 乙型脑炎病毒 E基因 基因型
• 年，卷（期）: 2008,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 2212-2215
• 页数: 4页
• 分类号: R373.3+1
• 字数: 3587字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-8685.2008.11.011

摘要

目的:应用实时荧光RT-PCR方法快速检测蚊体内乙型脑炎病毒,并对蚊体内携带的乙型脑炎病毒进行基因分型.方法:从蚊媒监测点采集蚊标本,研磨后提取RNA,用新型的LNA探针实时荧光RT-PCR方法进行高通量快速筛查蚊体携带的乙型脑炎病毒,对核酸阳性的标本进一步用乙型脑炎病毒E基因特异引物进行RT-PCR扩增和序列测定,根据所测序列与GenBank中不同地理来源乙型脑炎病毒株E基因核苷酸序列分析的结果进行基因型别的判定.结果:12575只蚊子分成254份,用实时荧光RT-PCR方法从来源于福州的2份三带喙库蚊标本中检出乙型脑炎病毒核酸阳性,经RT-PCR及核苷酸序列测定,得到一段长1500nt的E基因核苷酸序列,序列分析结果显示,其核营酸同源性最大的是来源于上海(DQ404100)和浙江(EU258742)的毒株,分别是99.1%和99.0%,均属于基因Ⅰ型病毒.结论:实时荧光RT-PCR方法是快速检测蚊体内乙型脑炎病毒的理想方法,此次调查发现的乙型脑炎病毒是以往福建省内未见报道的基因Ⅰ型病毒.