贝氏隐孢子虫PCR检测试剂盒的研制

• 作者: 刘霞 张媛媛 徐前明 李国清 杨建伟
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 贝氏隐孢子虫 18SrRNA ITS-1 PCR 试剂盒
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 241-244
• 页数: 4页
• 分类号: R832.3
• 字数: 4375字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2009.03.010

摘要

目的 研制禽类贝氏隐孢子虫的PCR检测试剂盒.方法 根据贝氏隐孢子虫18S rRNA和ITS-1序列,选取遗传标记位点最多的一段核苷酸序列作为特异PCR引物的靶序列,设计、合成了一对针对贝氏隐孢子虫的特异性引物 (YJWF:5'-ACTGATATACAATACCACGG-3'和YR:5'-GCGGATAAAGTTCAGGTTC-3'),对PCR反应条件进行了一系列优化,并分别对试剂盒的特异性、敏感性、稳定性、重复性和保存期等进行了系列研究.结果 该试剂盒能特异性地扩增出贝氏隐孢子虫基因组中相应片段,与安氏隐孢子虫,微小隐孢子虫,柔嫩艾美尔球虫等相关原虫基因组DNA无交叉反应;最低能检测到3.48个卵囊;反复冻融50次对试剂盒没有影响;室温条件下至少可保存4个月.结论 该试剂盒的各项指标达到了贝氏隐孢子虫的检测要求.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李国清	华南农业大学兽医学院	94	489	12.0	15.0
2	杨建伟	华南农业大学兽医学院	12	41	4.0	6.0
3	张媛媛	华南农业大学兽医学院	41	124	7.0	10.0
4	徐前明	华南农业大学兽医学院	9	31	3.0	5.0
5	刘霞	华南农业大学兽医学院	10	21	3.0	4.0