获能处理对山羊精子结合外源DNA能力的影响

• 作者: 孙新明 张家骅 王剑 王炜 赵永聚
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 山羊 精子 体外获能 外源DNA 质膜
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 动物科学
• 页码范围: 528-532
• 页数: 5页
• 分类号: S827|S814
• 字数: 4078字
• 语种: 中文

摘要

鲜精离心洗涤除去精浆,然后用0.4 μmol/L钙离子载体(IA组)作用10 min或用10 mg/L肝素(HE组)作用90 min获能后,与DNA孵育,再用地高锌(DIG)末端标记的线形外源DNA进行转染,用免疫组化的方法分别检测它们的转染效率;用透射电镜观察精子获能前后的超微结构变化,并用碘化丙锭和羟化荧光素双探针检测获能对精子质膜完整性的影响,探讨精子获能影响精子结合及内化外源DNA变化的原因.结果显示,获能处理降低了精子结合和内化外源DNA能力,IA组和HE组结合率分别为(17.41±4.69)%和(15.00±4.36)%,都极显著低于未经获能处理的精子(32.97±4.58)%(P<0.01).IA组、HE组和对照组(未获能)内化率分别为(12.09±2.50)%、(8.93±1.79)%和(25.52±2.57)%,IA组、HE组均极差异小于对照组(P<0.01).超微结构观察和双荧光探针检测都发现精子获能后质膜完整性降低.用IA或HE获能后的精子质膜完整率是分别是(33.16±6.46)%和(33.90±4.14)%,与对照组差异极显著(P<0.01).结果表明,精子结合及内化外源DNA不是纯粹的分子渗透现象,而是受严格的分子调控的.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张家骅	西南大学动物科技学院	106	645	13.0	20.0
2	王炜	西南大学动物科技学院	15	39	4.0	6.0
3	赵永聚	西南大学动物科技学院	20	177	7.0	13.0
7	王剑	西南大学动物科技学院	33	126	6.0	10.0