不同孵育时间对猪精子转染外源DNA效果的影响

• 作者: 周辉云 宋成义 李庆平 李碧春 毛九德 王宵燕 谢雨琇 高波
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪 精子 DNA 孵育时间
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1063-1069
• 分类号: S828
• 字数: 4760字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2011.06.012

摘要

建立稳定的精子载体法技术体系对家畜的转基因育种等研究具有重要意义.为获得公猪精子与DNA最佳共孵育时间,优化建立猪精子载体法技术体系,本研究通过定量PCR、荧光显微镜检测和精液常规分析方法等,研究分析猪精子与DNA不同共孵育时间对猪精子活力、活率、DNA转染率、吸附DNA和内化DNA量的影响.结果表明,多聚乙烯亚胺(polyethyleneimine,PEI)包裹的标记DNA与精子共孵育15、30、60和90 min后,随着孵育时间的延长,精子活力和活率有极显著下降(P＜0.01),而精子转染率呈极显著(P＜0.01)或显著(P＜0.05)上升,吸附外源DNA量和内化外源DNA量也呈上升趋势,但是30 min后不同孵育时间之间差异不显著(P＞0.05).此外,随着共孵育时间的延长,与精子转染率提高幅度相比,精子活力和活率的下降幅度更明显.综合考虑精子活力、活率、转染率、吸附DNA量和内化DNA量等参数,猪精子与外源DNA共孵育时间以30 min为最佳.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李碧春	扬州大学动物科学与技术学院	189	1267	18.0	27.0
2	高波	扬州大学动物科学与技术学院	64	338	9.0	15.0
3	宋成义	扬州大学动物科学与技术学院	80	646	13.0	22.0
4	周辉云	扬州大学动物科学与技术学院	6	22	3.0	4.0
5	谢雨琇	扬州大学动物科学与技术学院	3	11	2.0	3.0
6	李庆平	扬州大学动物科学与技术学院	5	11	2.0	3.0
7	王宵燕	扬州大学动物科学与技术学院	56	258	8.0	13.0