巨噬细胞内表达的人颗粒溶素对胞内结核分枝杆菌的杀菌活性

• 作者: 付玉荣 伊正君 何永林 朱道银 李俊明 李娜 杨春
• 来源期刊: 中华传染病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 蛋白质类 杀伤细胞 天然 巨噬细胞 分枝杆菌 结核 基因疗法
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 基础论著
• 页码范围: 69-73
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 3302字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1000-6680.2009.02.002

摘要

目的 构建携带人颗粒溶素(GLS)的真核表达质粒并探讨其表达后对巨噬细胞RAW264.7内结核分枝杆菌的杀菌能力.方法利用套式PCR从同种异型抗原激活的人CTL中扩增出GLS基因,并克隆入pBudCE4.1载体,构建重组质粒.将其转染至感染结核分枝杆菌H37Rv的巨噬细胞株RAW264.7中,套式PCR、免疫荧光检测GLS表达;转染96 h后裂解细胞作抗酸染色及菌落计数,检测GLS细胞内直接杀菌活性.数据行t或t'检验.结果成功构建携带GLS的真核表达质粒pBudCE4.1/GLS;在转染的已感染H37Rv巨噬细胞株RAW264.7中,从转录和翻译水平都检测到目标基因GLS的表达产物;转染96 h,佛波酯+pBudCF4.1/GLS组、佛波酯+pBudCE4.1组与未激活初始巨噬细胞荷菌量分别为(1.44±1.25)、(3.16±0.20)和(3.59±0.21)个,两两比较,差异均有统计学意义(t=2.403,t=2.854,均P＜0.05).结论携带人GLS的真核表达质粒在巨噬细胞表达后具有明显的杀菌活性,为进一步作为结核基因治疗疫苗的应用提供了实验依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱道银	重庆医科大学微生物学与免疫学教研室	113	510	10.0	15.0
2	杨春	重庆医科大学微生物学与免疫学教研室	83	257	8.0	11.0
3	何永林	重庆医科大学微生物学与免疫学教研室	49	129	6.0	7.0
4	李娜	重庆医科大学微生物学与免疫学教研室	63	261	9.0	11.0
5	李俊明	重庆医科大学微生物学与免疫学教研室	15	71	5.0	6.0