仁用杏ISSR分析体系的正交优化

• 作者: 张亚转 王佳 白锦军 魏安智
• 来源期刊: 分子植物育种
• 学科: 农学
• 关键词: 仁用杏 ISSR 正交优化
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 新思路、新技术、新方法
• 页码范围: 1237-1244
• 页数: 8页
• 分类号: S6
• 字数: 5776字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/mpb.007.001237

摘要

本研究以仁用杏丰仁为试材,采用经改良的CTAB法提取实验材料幼叶基因组DNA.利用正交设计法,从Mg~(2+)浓度、dNTPs浓度、引物浓度、Taq/DNA聚合酶及模板DNA用最5种因素4水平出发,构建和优化仁用杏ISSR-PCR反应体系,并采用直观分析和方差分析相结合的方法分析正交实验结果,最终建立了仁用杏ISSR-PCR最佳反应体系总体积20μL:1.5 U Taw DNA聚合酶、2.0 mmol/L MgCl_2、0.15 mmol/L dNTPs、0.35μmol/L引物、30～60 ng模板DNA.在优化体系的基础上筛选出 13个扩增稳定、多态性丰富的ISSR引物,并通过梯度PCR试验,确定每个引物的最适退火温度.经对最佳反应体系和程序进行了验证,结果显示该体系具有扩增稳定性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	魏安智	西北农林科技大学生命学院	81	1059	18.0	28.0
2	王佳	西北农林科技大学生命学院	19	180	7.0	13.0
3	白锦军	西北农林科技大学生命学院	2	29	2.0	2.0
4	张亚转	西北农林科技大学生命学院	1	27	1.0	1.0