猪脑心肌炎病毒VP2蛋白单克隆抗体的制备及其识别表位分析

• 作者: 杨汉春 盖新娜 贾红 郭鑫 魏莹
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 脑心肌炎病毒 VP2蛋白 单克隆抗体 表位识别
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 病毒
• 页码范围: 33-37
• 页数: 5页
• 分类号: S852.65
• 字数: 3102字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-6422.2009.01.006

摘要

为获得针对猪源EMCV结构蛋白VP2的特异性单克隆抗体,本试验以EMCV结构蛋白VP2为对象,将EMCV BJC3株VP2基因定向插入穿梭质粒中,构建重组腺病毒AdV-VP2,免疫BALB/c小鼠制备单克隆抗体,利用Pepscan技术对单抗识别的抗原位点进行分析.结果显示,间接ELISA及间接免疫荧光法筛选获得了2个阳性细胞克隆株,命名为C11和G8.经检测杂交瘤细胞培养上清抗体效价为1:1 600,腹水效价分别为1:2.56×106和1:1.28×106,中和试验鉴定均无中和活性.Western-blot鉴定表明获得的2株单抗均能识别原核表达的重组VP2蛋白.亚类鉴定结果显示2株单抗均为IgG2b亚类,轻链均为κ型.Pepscan分析结果显示,这2株单抗可分别识别EMCV VP2蛋白上的2个B细胞线性表位.本研究获得的蛋白十分接近于其天然构象,很大程度上保证了病毒表面抗原位点的结构和功能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨汉春	中国农业大学农业部人畜共患病重点开放实验室	277	4554	34.0	54.0
2	郭鑫	中国农业大学农业部人畜共患病重点开放实验室	93	2187	24.0	44.0
3	盖新娜	中国农业大学农业部人畜共患病重点开放实验室	21	179	7.0	13.0
4	贾红	中国农业大学农业部人畜共患病重点开放实验室	28	129	6.0	10.0
5	魏莹	中国农业大学农业部人畜共患病重点开放实验室	1	6	1.0	1.0