鸡传染性贫血病毒VP2蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

• 作者: 曹红 李夏莹 李晓齐 王永强 覃尧 郑世军 陈延飞
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: 鸡传染性贫血病毒 VP2蛋白 原核表达 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 调查研究
• 页码范围: 3-6,9
• 页数: 5页
• 分类号: S852.65
• 语种: 中文

摘要

为制备CIAV VP2单克隆抗体,将原核表达的His-VP2融合蛋白作为免疫原免疫BALB/c小鼠.经4次免疫后,取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)融合.将原核表达的GST-VP2融合蛋白作为包被抗原,利用间接ELISA筛选阳性克隆.阳性细胞株经3次亚克隆后,获得3株稳定分泌抗CIAV VP2蛋白的杂交瘤细胞克隆,分别命名为3D7、3B8、2D3.经间接ELISA测定,以上3株杂交瘤细胞腹水效价分别为1∶8.0× 105、1∶4.0×105,以及1∶6.4×106,亲和力解离常数分别为7.34×10-11、2.65× 10-11,以及2.98×10-11.IgG亚类分别为IgG1、IgG2b以及IgG2b.经Western Blot试验证明,3D7株单抗能特异地识别CIAV VP2蛋白,其识别的抗原表位区域为VP2 N-端的20～40 aa.经IFA试验证明,3株单抗均能识别天然的CIAV VP2蛋白.此单抗为研究CIAV VP2的生物学功能和CIAV致病机理奠定基础.