逆转录病毒载体介导的RNAi抑制乳腺癌细胞BSP基因表达

• 作者: 冼江 夏冰 张宏斌 杨自飞 燕慧 王捷 王江涛
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 乳腺癌 骨唾液酸蛋白 逆转录病毒 RNA干扰 基因表达与调控
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 415-419
• 页数: 5页
• 分类号: Q7
• 字数: 4169字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2009.05.009

摘要

目的 构建抑制人BSP基因表达的RNA干扰逆转录病毒载体,筛选建立稳定抑制BSP表达的MDA-MB-231BO细胞系.方法 构建靶向人BSP基因的逆转录病毒重组质粒pSilencer-BSP27、pSilencer-BSP81和pSilencer-BSP100.将其包装成病毒后感染MDA-MB-231BO细胞.用RT-PCR和Western印迹检测成功感染细胞(231BO-BSP27、231BO-BSP81、231BO-BSP100细胞)BSP基因的抑制效果.结果 双酶切和测序结果显示重组核酸片段序列与设计的序列完全相同.RT-PCR和Western印迹结果显示231BO-BSP27、BO-BSP81和231BO-BSP100细胞BSP基因在mRNA水平和蛋白水平抑制效率分别为:70.8 %、79.4 %和30.1 %;69.3 %,75.2 %和27.8 %.结论 成功构建抑制人BSP基因表达的RNAi逆转录病毒载体pSilencer-BSP27、pSilencer-BSP81和pSilencer-BSP100.获得高效稳定抑制BSP表达的231BO-BSP27、231BO-BSP81细胞系.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王捷	广州军区广州总医院医学实验科	255	1186	14.0	20.0
2	张宏斌	广州军区广州总医院医学实验科	95	457	11.0	16.0
3	冼江	广州军区广州总医院医学实验科	71	302	10.0	13.0
4	王江涛	广州军区广州总医院医学实验科	18	49	4.0	5.0
5	夏冰	广州军区广州总医院医学实验科	62	200	8.0	11.0
6	燕慧	广州军区广州总医院医学实验科	4	33	3.0	4.0
7	杨自飞	广州军区广州总医院医学实验科	2	15	2.0	2.0