逆转录病毒载体介导大鼠乳腺癌细胞共表达MIP-1α和B7-1

• 作者: 卫立辛 张长松 林晨 王振发 王烈 王瑜 覃林花 陈少全
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: MIP-1α B7-1 逆转录病毒载体 大鼠乳腺癌 SHZ-88细胞
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 132-136
• 页数: 5页
• 分类号: R392.7
• 字数: 3861字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2007.02.007

摘要

目的:建立共表达小鼠MIP-1α和B7-1基因的大鼠乳腺癌细胞株,并进行体外活性检测.方法:应用含不同选择标记的重组逆转录病毒载体,经1 mg/ml G418和2 μg/ml puromycin双药物筛选后获得MIP-1α+B7-1基因共表达的大鼠乳腺癌细胞株.RT-PCR、免疫组化检测mMIP-1α的表达,RT-PCR、流式细胞术检测mB7-1的表达;将共表达MIP-1α和B7-1的肿瘤细胞与大鼠脾淋巴细胞混合培养后,MTT法检测淋巴细胞的增殖指数、琼脂糖打孔法检测共表达MIP-1α和B7-1肿瘤细胞对单个核细胞的趋化活性.结果:经脂质体转染包装细胞产生的重组逆转录病毒上清病毒滴度达4.6×107CFU/L.细胞生长曲线显示,重组逆转录病毒感染对乳腺癌细胞增殖无明显影响.重组逆转录病毒感染的大鼠乳腺癌细胞株SHZ-88/mMIP-1α+mB7-1有B7-1和MIP-1α mRNA及蛋白的表达.淋巴细胞增殖指数PI值SHZ-88/PLXSN组为(0.76±0.25),SHZ-88/mMIP-1α+mB7-1组为(1.95±0.31),后者体外刺激淋巴细胞增殖能力增强(P＜0.01),SHZ-88/pBabe puro组的趋化指数为(0.99±0.19),mMIP-1α+mB7-1组的为(3.88±0.33),后者显著增强了趋化活性.结论:通过逆转录病毒载体介导建立MIP-1α和B7-1基因共表达的大鼠乳腺癌细胞株具有招引单个核细胞,并将其激活的体外生物学活性.