嘌呤霉素抗性基因捕获载体的构建及在细胞中的功能验证

• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 捕获载体 嘌呤霉素抗性基因捕获载体 Hep2.2.15肝癌细胞系
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 490-493
• 页数: 4页
• 分类号: R512.6
• 字数: 2809字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2009.06.004

摘要

目的 构建具有嘌呤霉素抗性基因捕获载体,扩大基因捕获载体的应用范围.方法 用经改造的捕获载体(gene trapping vector)稳定转染HepG2.2.15肝癌细胞系,经嘌呤霉素筛选,制作单克隆细胞株.用PCR方法验证该载体的在细胞染色体中的整合,ELISA方法证明捕获载体捕获基因后的细胞的功能改变.结果 嘌呤霉素抗性基因捕获载体整合在HepG2.2.15肝癌细胞的染色体上,并能影响细胞HBsAg和HBeAg的分泌.结论 新构建的嘌呤霉素抗性基因捕获载体能在具有G418抗性的细胞中捕获有意义的目的 基因.