分子信标检测限制性内切酶活性的新型荧光分析方法

• 作者: 周兴旺 李伟 李军 羊小海 霍希琴 颜鸿飞
• 来源期刊: 生命科学研究
• 学科: 生物学
• 关键词: 分子信标 荧光分析 限制性内切酶
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 6-10
• 页数: 5页
• 分类号: Q55
• 字数: 3048字
• 语种: 中文

摘要

利用分子信标被切割后荧光信号的变化.发展了一种简便的检测限制性内切酶活性的新型荧光分析方法.以限制性内切酶Xsp I为例.将其识别位点嵌入具有茎环结构的分子信标探针(Molecular Beacon,MB)的环状部分,利用这种分子信标在溶液中形成的瞬时二聚体结构,实现了限制性内切酶对分子信标的切割.在优化的条件下,反应初速度与酶的浓度成正比,线性范围为0.05～50 U/mL,检测限为0.05 U/mL.通过改变分子信标环部的识别位点的序列.还可以检测其他限制性内切酶如Alu I的活性.