限制性内切酶KpnⅠ和EcoRⅠ双酶切条件的优化

• 作者: 向国艳 姜晓明 张中新 张雲乔 朱杭飞 藏雨轩 郝峰
• 来源期刊: 吉林医药学院学报
• 学科: 生物学
• 关键词: KpnⅠ EcoRⅠ 双酶切 优化 DNA琼脂糖凝胶电泳
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 250-253
• 页数: 4页
• 分类号: Q-33
• 字数: 3511字
• 语种: 中文

摘要

目的：探讨KpnⅠ和EcoRⅠ双酶切的优化条件。方法 KpnⅠ和EcoRⅠ不同的酶切体系，酶切含有上述两种限制性内切酶酶切位点的载体pEGFP-Ano2，DNA琼脂糖凝胶电泳检测酶切结果，以获取KpnⅠ和EcoRⅠ双酶切的优化条件。结果50μL酶切体系，KpnⅠ和EcoRⅠ双酶切的适宜条件：首先在1×L缓冲液情况下，应用1μL KpnⅠ酶切1μg质粒1 h，再加入1×H缓冲液和0．01％BSA，应用1μL EcoRⅠ继续酶切1 h。结论获取KpnⅠ和EcoRⅠ双酶切质粒的适宜条件，为今后应用KpnⅠ和EcoRⅠ双酶切实验提供科学的参考依据。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郝峰	吉林医药学院生物化学检验教研室	44	70	3.0	5.0
2	藏雨轩	吉林医药学院生物化学检验教研室	3	6	2.0	2.0
3	朱杭飞	吉林医药学院生物化学检验教研室	2	6	2.0	2.0
4	向国艳	吉林医药学院生物化学检验教研室	2	6	2.0	2.0
5	张雲乔	吉林医药学院生物化学检验教研室	2	6	2.0	2.0
6	张中新	吉林医药学院生物化学检验教研室	1	3	1.0	1.0