ANXA1的克隆,表达及对树突状细胞转染的方法

• 作者: 田野苹 闵彦
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 医学
• 关键词: 膜联蛋白1 分子克隆 转染 树突状细胞
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 论文
• 页码范围: 404-408
• 页数: 5页
• 分类号: R52|R446.61
• 语种: 中文

摘要

膜联蛋白1(ANXA1)是一种抗炎因子,但是ANXA1对单核细胞来源树突状细胞(monocyte-derived dendritic cells,MoDCs)功能成熟的影响还未见报道.首先以pShuttle-CMV为载体,通过一系列分子克隆技术,构建了ANXA1高表达质粒pShuttle-CMV-ANXA1.笔者将pShuttle-CMV-ANXA1转染细胞株293a,用western-blot法验证ANXA1高表达情况.结果表明,pShuttle-CMV-ANXA1可引起293a表达ANXA1增高;表明,pShuttle-CMV-ANXA1构建是成功的.然后,用脂质体转染试剂GenePorterⅡ将荧光对照质粒pShuttle CMV-VNG-IRES转染TNF-α-MoDCs.通过镜下荧光可知,GenePorter Ⅱ将对照质粒转染MoDCs的效率＞80%;表明,GenePorterⅡ是一种较好的转染MoDCs的方法.用GenePorterⅡ将pShuttle-CMV及pShuttle-CMV-ANXA1转染TNF-α-MoDCs,通过westem-blot法检测ANXA1在TNF-α-MoDCs中的高表达情况.结果表明,与pShuttle-CMV相比,pShuttle-CMV-ANXA1可引起TNF-α-MoDCs高表达ANXA1;成功将pShuttle-CMV-ANXA1转入MoDCs,并得到表达.GenePorterⅡ转染树突状细胞的新方法,简单高效,为进一步研究ANXA1对MoDCs的生物学功能奠定了基础.获得的高表达ANXA1的树突状细胞,可望在自身免疫病及移植排斥反应中得到应用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	田野苹		53	378	9.0	18.0
2	闵彦		10	20	3.0	4.0