重组PACAP衍生物RBAY-2的高效制备及二肽基肽酶对其酶解研究

• 作者: 洪岸 洪爱华 马义 马民
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 医学
• 关键词: 液质联用质谱 基因重组 PACAP衍生物 二肽基肽酶Ⅳ
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 论文
• 页码范围: 409-413,420
• 页数: 6页
• 分类号: Q514.3|R966
• 语种: 中文

摘要

为了利用基因工程技术高效制备具有治疗Ⅱ型糖尿病功能的垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)衍生物RBAY-2,研究二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)对其酶解效应,采用基因重组技术表达重组肽RBAY-2,纯化并鉴定目的肽RBAY-2,检测其生物活性;通过LC-MASS技术检测并绘制PACAF衍生物RBAY-2在体外模拟环境中的浓度-时间曲线,测定其体外模拟条件下的半衰期.实验结果表明:利用重组肽技术制备的RBAY-2的M为3.756k,纯度大于96%,其产率为18.3毫克/(每升发酵产物);制备的RBAY-2可与VPAC2受体特异结合并显著促进VPAC2-CHO细胞cAMP的产生,其受体半激活浓度(EC50)为0.93 nmol/L,目的肽RBAY-在体外可被DPPⅣ酶解,其半衰期为45.1 min.由此表明,利用本研究确立的表达、纯化策略可实现高活性RBAY-2的高效制备,应用LC-MASS技术研究药物肽体外酶解效应是一种方便、准确的检测方法,可用于药物肽稳定性的初步检测和高稳定性药物肽的体外筛选.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	洪岸		107	856	14.0	25.0
2	马民		77	857	15.0	25.0
3	洪爱华		24	300	10.0	17.0
4	马义		38	182	8.0	11.0