应用RNAi技术沉默大转录本基因LRP1B

• 作者: 李若 李钰 王山 田艳艳 聂桓 高勇
• 来源期刊: 遗传
• 学科: 生物学
• 关键词: RNAi 大转录本基因 LRP1B HEK 293
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 36-42
• 页数: 7页
• 分类号: Q3
• 字数: 6873字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1005.2008.00036

摘要

低密度脂蛋白受体相关蛋白1B(Lipoprotein receptor-related protein 1 B,LRP1B)是脂蛋白受体家族庞大受体亚群的成员之一,LRP1B基因编码一个长达16.5 kb的大转录本.由于LRP1B的转录产物过大限制了其功能研究.为研究LRP1B基因与肿瘤转移的相关性,文章应用RNAi技术特异地封闭了LRP1B基因的表达.在设计siRNA过程中,根据高效siRNA序列特征和靶序列处的mRNA二级结构特点,对LRP1B基因多达1100个的siRNA候选靶序列进行双重评价,最终在基因转录本的不同位置选取了6个siRNA靶位点.针对这些靶位点,文章构建了6个表达shRNA的pSilencer4.1重组体,稳定转染HEK 293细胞并采用半定量RT-PCR检测各表达载体的沉默效果.结果表明,所构建的6个shRNA-pSilencer4.1重组体中有5个对LRP1B基因形成了有效沉默(>50%),并得到了多个完全封闭LRPIB基因表达的HEK 293细胞单克隆.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高勇	哈尔滨工业大学生命科学与工程系	12	40	4.0	5.0
2	李钰	哈尔滨工业大学生命科学与工程系	24	220	8.0	14.0
3	田艳艳	哈尔滨工业大学生命科学与工程系	2	4	2.0	2.0
4	王山	哈尔滨工业大学生命科学与工程系	2	11	2.0	2.0
5	聂桓	哈尔滨工业大学生命科学与工程系	4	2	1.0	1.0
6	李若	哈尔滨工业大学生命科学与工程系	2	8	2.0	2.0