农杆菌浸种法介导中华结缕草遗传转化体系的建立

• 作者: 刘水 吕慧 吴燕民 王丹 雷江丽
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 中华结缕草 农杆菌浸种法 遗传转化
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 865-871
• 页数: 7页
• 分类号: S188
• 字数: 4465字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2009.05.021

摘要

以中华结缕草(Zoysia sinica Hance)萌动种子为转化受体,利用新霉素磷酸转移酶基因(neomycin phosphotransferaseⅡ,nptⅡ)作为筛选基因,对影响根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的遗传转化外部因素进行了实验,通过优化转化条件,建立了农杆菌浸种途径介导的中华结缕草遗传转化体系.结果表明,利用催芽6～7 d的种子,加入OD600为0.9的农杆菌浸染菌液(在浸染菌液中添加100μmol/L乙酰丁香酮),附加5 min抽真空并在迅速恢复常压后再抽真空30 s的处理,振荡浸染48 h,共培养3 d后用75 mg/L卡那霉素筛选能够获得较好的转化效果.通过对卡那霉素抗性苗进行PCR检测和GUS组织化学染色.初步验证nptⅡ和β-葡萄糖苷酶基因(β-glueuronidase,gus)已经整合进植物基因组,阳性转化率为55.21%.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴燕民	中国农业科学院生物技术研究所	38	617	11.0	24.0
2	雷江丽		19	169	8.0	12.0
3	王丹		5	27	3.0	5.0
4	刘水		9	49	5.0	7.0
5	吕慧		3	24	3.0	3.0