单链抗体与lidamycin辅基蛋白融合蛋白工程菌的高密度发酵及其免疫活性

• 作者: 张秀敏 李电东 王玉凤 赵宝明 赵春燕 高瑞娟
• 来源期刊: 中国抗生素杂志
• 关键词: 单链抗体 lidamycin辅基蛋白 分批发酵 补料分批发酵 免疫活性
• 年，卷（期）: 2009,（9）
• 所属期刊栏目: 遗传育种与生物合成
• 页码范围: 536-540
• 页数: 5页
• 分类号: Q789
• 语种: 中文

摘要

目的 实现抗Ⅳ型胶原酶单链抗体(Fv)与lidamycin辅基蛋白(LDP)结合构成的融合蛋白Fv-LDP产生菌的高密度发酵,并测定融合蛋白Fv-LDP免疫活性.方法 先在5L发酵罐中进行工程菌分批发酵和补料分批发酵,再用同定化金属亲和层析从菌体中纯化融合蛋白Fv-LDP,分步透析使之复性,酶联免疫吸附试验和免疫荧光细胞化学染色检测其免疫活性.结果 确定分阶段恒速补料分批发酵为工程菌最佳高密度发酵模式,融合蛋白Fv-LDP最高表达量为4g/L,A600为55左右,培养时问约14h.融合蛋白Fv-LDP对Ⅳ型胶原酶呈阳性免疫反应,能与PG细胞特异结合.结论 确定了工程菌高密度发酵工艺,融合蛋白Fv-LDP免疫活性良好,为融合蛋白Fv-LDP与lidamycin烯二炔发色团(AE)构成的小型高效化抗体药物Fv-LDP-AE的研究奠定良好基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李电东	中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所	43	380	11.0	18.0
2	高瑞娟	中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所	5	9	2.0	2.0
3	赵春燕	中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所	7	13	2.0	2.0
4	王玉凤	中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所	3	5	2.0	2.0
5	张秀敏	中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所	8	34	3.0	5.0
6	赵宝明	中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所	1	2	1.0	1.0