抗重组幽门螺杆菌VacA单克隆抗体的制备

• 作者: 张绍兰 杨致邦 毛小琴 田一玲 邓颖 黄进
• 来源期刊: 免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 幽门螺杆菌 致细胞空泡毒索 单克隆抗体 酶联免疫吸附试验
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 100-104
• 页数: 5页
• 分类号: R378.2
• 语种: 中文

摘要

目的 制备抗重组幽门螺杆菌致细胞空泡毒素抗原(VacA)的单克隆抗体(mAb).方法 用基因工程菌pQr30-v-DH5α大最表达重组蛋白VaeA,经Ni2+-NTA树脂纯化后,Western blot鉴定抗原性,免疫家兔后ELISA法检测血清VacA抗体鉴定其免疫原性.用重组vacA免疫Balb/c小鼠.取免疫鼠脾细胞与骨髓瘤SP2/O细胞融合,HAT选择性培养和间接EIJSA进行筛选,并检测所分泌抗体的效价和分析Ig类别.结果 获得4株能稳定分泌VacA mAb的杂交瘤细胞,能分泌IgG2b、lgM和IgG1 3类抗体,轻链均为k型.其中,IgG1 mAb经Western blot鉴定能与重组VacA发牛特异性反应.结论 应用纯化的重组VacA,成功获得了能稳定分泌幽门螺杆菌VacA单克隆抗体的杂交瘤细胞,并制备了单克隆抗体.为进一步研制检测VacA的试剂盒及探讨VacA的致病机制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨致邦		119	522	12.0	17.0
2	田一玲		16	60	5.0	7.0
3	邓颖		13	47	5.0	6.0
4	黄进		11	36	4.0	5.0
5	张绍兰		5	43	3.0	5.0
6	毛小琴		8	33	3.0	5.0