复合免疫制备3种有机磷农药单克隆抗体的技术研究

• 作者: 刘凤权 刘扬 吴芸茹 娄旸 王利民 胡白石
• 来源期刊: 南京农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 甲基对硫磷 杀螟硫磷 甲基毒死蜱 半抗原 单克隆抗体 ELISA
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 页码范围: 94-99
• 页数: 6页
• 分类号: S4823
• 字数: 4977字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-2030.2009.04.018

摘要

以α-氨基丁酸和农药中间体为原料合成了甲基对硫磷、杀螟硫磷和甲基毒死蜱3种有机磷农药人工半抗原(H1、H2和H3);通过活泼酯法将H1、H2和H3分别交联于牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)上制备免疫原和包被原.以等体积混合的 H1-BSA、H2-BSA和H3-BSA复合免疫BALB/c小鼠,采用常规杂交瘤技术制备单克隆抗体获4株抗上述复合抗原的单克隆抗体,其中甲基对硫磷1株(H9/A3),杀螟硫磷2株(H9/B3、C8/H6),甲基毒死蜱1株(G7/F5).所获4株抗体的类型及亚类均为IgG1,轻链均为κ链,间接ELISA法测定腹水效价均高达1×10~6.间接竞争ELISA法测定H9/A3、C8/H6和G7/F5细胞株的抑制中浓度(I_(50))分别为1070、404和752 μg·L~(-1),且与类似物无交叉反应.本研究建立了一种可在较短的研制周期内,通过单次细胞融合获得多种不同农药的单克隆抗体的有效方法.