突变型K-ras siRNA抑制肺癌A549细胞的增殖和迁移并诱导细胞凋亡

• 作者: 刁勇 吕颖慧 李招发 王启钊 许瑞安
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肺肿瘤 RNAi K-ras A549细胞 NCI-H446细胞
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 专题报道:肺癌生物治疗的基础研究
• 页码范围: 564-569
• 页数: 6页
• 分类号: R734.2|R730.54
• 字数: 4544字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2009.06.003

摘要

目的:构建靶向K-ras的siRNA,研究K-ras siRNA对K-ras基因突变型肺癌细胞A549及K-ras野生型小细胞肺癌细胞NCI-H446生长和迁移的抑制作用.方法:设计并人工合成4条K-ras siRNA(针对野生型K-ras基因的K-ras siRNAl～K-ras siRNA3;针对突变型K-ras基因的K-ras siRNA4),并分别转入A549和NCI-H446细胞.RT-PCR和Western blotting检测不同K-ras siRNA对K-ras mRNA和蛋白表达的影响,MTT法检测不同K-ras siRNA对A549和NCI-H446细胞增殖的抑制作用,Transwell实验和Hoechst 33258染色检测K-ras siRNA对细胞迁移和凋亡的影响.结果:靶向突变型K-ras的K-ras siR-NA4能特异性抑制A549细胞中K-ras的表达,但时N-ras和H-ras的表达没有影响.K-ras siRNA4抑制A549细胞的增殖,但不影响含野生型K-ras基因的NCI-H446细胞的增殖.K-ras siRNA4还能诱导A549细胞凋亡、抑制A549细胞迁移.结论:针对突变型K-ras基因的siRNA可特异性抑制K-ras突变型肺癌细胞的增殖和迁移,并诱导该细胞凋亡,K-ras siRNA可望用于K-ras突变型肿瘤特别是肺癌的个体化治疗.