高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒HuN4株致弱毒株特异性抗原表位的鉴定

• 作者: 于海 周艳君 姜一峰 安同庆 张善瑞 彭金美 李国新 王瑜 田志军 童光志 肖燕 闫丽萍 韦天超
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: PRRSV HuN4株 非结构蛋白Nsp2 抗原表位
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 所属期刊栏目: 病毒
• 页码范围: 1-7
• 页数: 7页
• 分类号: S858.282.65
• 字数: 3084字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-6422.2009.03.001

摘要

通过对高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(Highly Pathogenic Porcine Reproductive and Respiratory SyndromeVirus,HP-PRRSV)HuN4株亲本毒及其不同代次传代毒株Nsp2(Nonstndural protein 2)蛋白氨基酸序列比较分析,发现不同代次的Nsp2蛋白存在4处氨基酸点突变,针对每个突变点分别人工合成编码短肽的核苷酸序列,经原核表达后进行Western blot分析.结果表明表达的融合蛋白F65-11(749KGEPVDQPAK759)能够特异性的与HuN4-F40、HuN4-F65和HuN4-F112感染猪的血清发生反应,而与HuN4 F5感染猪的阳性血清和CH-1a株阳性血清不发生反应,证实第4个氨基酸点突变(S754)处存在一个免疫优势抗原表位.将该表位肽段由N端和C端逐步缩短继续鉴定,当N端缩短到第5个氨基酸(754SDQPAK759)C端缩短到第3个氨基酸(749KGEPVSDQ757)时,表达的融合蛋白不能与PRRSV阳性血清反应,最终推测该抗原表位必需氨基酸为753VSDQ756.选取GenBank中提交的部分高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒的Nsp2氨基酸序列,对该表位氨基酸所在位置进行序列比较,分析结果显示位于Nsp2蛋白749→759位氨基酸序列高度保守,F65-11变异位点C754→S754为HuN4株系列传代毒株所特有.本研究结果证实抗原表位F65-11可以作为鉴别HuN4-F112弱毒疫苗所诱导产生的特异性抗体的候选抗原.