大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养与初步鉴定

• 作者: 杨仕明 秦贺 翟所强 赵立东 郑贵亮 郭维维 陈光涛
• 来源期刊: 中华耳科学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 大鼠 骨髓间充质干细胞 分离培养 细胞分化 鉴定
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 毛细胞再生与聋病基因治疗专辑
• 页码范围: 357-361
• 页数: 5页
• 分类号: R394.26
• 字数: 4222字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-2922.2009.04.022

摘要

目的 探讨体外分离、传代培养大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的方法 ,并对培养细胞进行初步鉴定,为利用大鼠骨髓MSCs进行感音神经性聋细胞移植治疗的研究奠定基础.方法 用贴壁培养法分离大鼠骨髓细胞,第1组于24小时全量换液,第2组于24小时半量换液,第3组于3天全量换液,传代扩增.相差显微镜进行形态学观察;RT-PCR检测培养细胞表面分子表达:定向诱导培养细胞向成脂细胞、成骨细胞方向分化.结果 24小时首次全量换液组培养7天后观察见少量细胞集落,细胞形态不规则;24小时首次半量换液组培养7天后观察见较多细胞集落,细胞规则,呈梭形、椭圆形:3天首次全量换液组培养7天后观察见较多悬浮细胞,与贴壁细胞混杂在一起.培养细胞表面分子SH2、CD31、CD44呈阳性表达,但不表达CD34.第2组培养细胞传代后加入不同诱导剂定向诱导分化一定阶段,分别经油红O及yon Kossa法染色鉴定证实MSCs可分别向脂肪细胞及成骨方向分化.结论 本实验分离培养的大鼠骨髓原代细胞24小时首次半量换液培养利于大鼠骨髓MSCs的分离和纯化,可稳定表达SH2、CD31、CD44.MSCs具有多项分化潜能.