幽门螺杆菌cheA和cheY基因表达及其产物与细菌趋化的相关性

• 作者: 严杰 吴盛海 徐丽慧 王贤军
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 幽门螺杆菌 Che家族蛋白 原核表达 趋化
• 年，卷（期）: 2009,（12）
• 所属期刊栏目: 细菌学
• 页码范围: 1099-1103
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 4328字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2009.12.012

摘要

目的 克隆幽门螺杆菌趋化相关基因cheA和they并构建其原核表达系统,建立幽门螺杆菌体外趋化模型并确定其趋化诱导物质,了解特异性抗体和氯氰碘柳胺对幽门螺杆菌趋化的抑制作用.方法 PCR扩增幽门螺杆菌NCTC11637株全长cheA和cheY基因片段,T-A克隆后测序.构建上述目的基因原核表达系统,采用SDS-PAGE和Bio-Rad凝胶成像分析系统检查目的重组蛋白rCheA和rCheY的表达情况,Ni-NTA亲和层析法提纯rCheA和rCheY.rCheA和rCheY免疫家兔获得抗血清,用饱和硫酸铵沉淀法和DEAE-32离子交换法提纯IsG,用免疫扩散法检测抗血清及其IsG效价.采用硬琼脂法建立幽门螺杆菌NCTC11637株体外趋化模型并检测11种物质的趋化诱导作用,同时分别观察抗rCheA IgG(rCheA-IgG)和氯氰碘柳胺钠对细菌趋化的抑制作用.结果 PCR扩增获得预期大小的cheA和cheY基因片段,其核苷酸和氨基酸序列与文献报道完全相同.所构建的原核表达系统能有效表达rCheA和rGheY.rCheA和rCheY兔抗血清及其IgG免疫扩散效价均分别为1:4和1:2.盐酸、硫酸和乙酸对该幽门螺杆菌均有趋化诱导作用,一定浓度的rCheA-IgG和氯氰碘柳胺钠均对幽门螺杆菌趋化有抑制作用(P<0.05).结论 本研究成功地构建了幽门螺杆菌NCTC11637株cheA和cheY基因原核表达系统.H~+是诱导幽门螺杆菌趋化的信号物质,rCheA-IgG和氯氰碘柳胺钠均能抑制幽门螺杆菌对H~+的趋化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	严杰	浙江大学医学院病原生物学系	265	1149	14.0	20.0
2	徐丽慧	杭州市第一人民医院检验科	8	62	5.0	7.0
3	王贤军	杭州市第一人民医院检验科	38	263	9.0	13.0