灵芝漆酶基因转录Cu2+诱导特性及其启动子的克隆与序列分析

• 作者: 丁一新 吴婧 李玉祥 欧阳翔 赵明文
• 来源期刊: 南京农业大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 灵芝 漆酶 半定量RT-PCR selGformed adaptor PCR 转录调控
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 页码范围: 36-40
• 页数: 5页
• 分类号: Q939.5
• 字数: 4122字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-2030.2009.01.008

摘要

以Cu2+为诱导物检测了灵芝漆酶同工酶基冈的转录特性,并对其启动子进行了克隆及序列分析.研究发现:灵芝漆酶基因在cu2+的作用下表达量出现明显差异,其中以在发酵液中添加3.0 mmol·L-1Cu2+、诱导时间为6 d时,漆酶基因的mRNA表达量最高.根据GenBank中已报道的灵芝漆酶基冈的序列信息,经PCR扩增获得了灵芝漆酶5'端长879bp的基凶特异序列,进而通过self-tbrmed adaptor PCR(SEFA-PCR) 方法,扩增得到灵芝漆酶基因起始密码子上游长832bp的启动子序列.分析表明,该启动子区域除分布有TATA-box、CAAT-box及GC-box等基本的转录起始元件外,还存在多个潜在的顺式作用元什序列位点,包括4个MRE元件、4个STRE元件、11个HSE元件和5个氮因子结合位点等.