应用反向斑点杂交技术从转录序列的选择性捕获中筛选副猪嗜血杆菌表达差异基因

• 作者: 万云 刘翠云 周锐 楚杰 胡军勇 谢启运 金卉 陈焕春
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 副猪嗜血杆菌 差异表达基因 转录序列的选择性捕获 反向斑点杂交
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 189-194
• 页数: 6页
• 分类号: S188
• 字数: 4524字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2009.02.002

摘要

通过对靶DNA的种类和浓度、探针浓度、紫外交联时间等反向斑点杂交条件优化,建立了一种从选择性捕获的转录序列(selective capture of transcribed sequences,SCOTS)库中筛选副猪嗜血杆菌在体内、外差异表达的基因的方法.通过反向斑点杂交技术从10个样品中筛选出的6个样品被证明是副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasufs)在体内上调表达或者是特异表达的基因.结果表明:SCOTS技术能够有效地获得一个可能存在差异表达基因的cDNA文库,而反向斑点杂交技术可以有效地从中筛选到差异表达基因.