微小RNA-375调控NIT-1胰岛细胞脂性凋亡

• 作者: 严励 傅祖植 刘珊英 李焱 梁颖 许雪娟
• 来源期刊: 中华糖尿病杂志
• 关键词: RNA干扰 脂性凋亡 微小RNA-375 Myotrophin 反义技术
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 368-373
• 页数: 6页
• 字数: 5347字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.J.issn.1674-5809.2009.05.013

摘要

目的 探讨提高或降低内源性微小RNA-375(miRNA-375)的水平是否影响小鼠胰岛β细胞NIT-1的脂性凋亡.方法 以500μmol/L长链不饱和游离脂肪酸棕榈酸孵育NIT-1 48 h,建立脂性凋亡模型,并以蛋白免疫印迹法(Western blot)检测重组胰岛素样生长因子1(V1)表达水平.将NIT-1分为:空白组(正常培养细胞),空转组(等量lipo 2000),阴性对照miRNA组(等量lipo 2000+阴性对照miRNA),miRNA-375组(等量lipo 2000+miRNA-375)(提高内源性miRNA-375水平),2'-O-me-375组(等量lipo 2000+2'-O-me-375)(降低内源性miRNA-375水平).在2 ml转染体系,通过转染脂质体lipo 2000 5 μl(空白组不加),以80 nmol/L miRNA或对照物(空转组不加)转染NIT-1,72 h后各组分别予500μmoL/L棕榈酸孵育48 h.72 h后各组分别予500μmol/L棕榈酸孵育48 h.以Hochest 33342染色和脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测并计算凋亡率,以Western blot检测V1表达水平.结果 棕榈酸组凋亡细胞数明显比对照组增多,而V1表达水平比对照组下降约66.8%(t=5.051,P＜0.0001).与其他三组比较,miRNA-375组脂性凋亡率最高,比空白组升高73.7%(Hochest:P＜0.0001;TUNEL:P＜0.0001),比阴性对照miRNA组升高1.47倍(Hochest:P＜0.0001;TUNEL:P＜0.0001).miRNA-375组V1表达水平降低,比阴性对照miRNA组降低56.06%(P＜0.05).而另一方面,与其他三组比较,2'-O-me-375组脂性凋亡率最低,比空白组降低64.7%(Hochest:P＜0.0001;TUNEL:P＜0.0001),比阴性对照miRNA组下降49.6%(Hochest:P＜0.0001;TUNEL:P=0.001).2'-O-me-375组V1表达水平最高,比空白组升高5.33倍(P＜0.0001),比阴性对照miRNA组升高75.9%(P=0.021).结论 棕榈酸诱导小鼠胰岛细胞凋亡伴有V1表达水平下降;miRNA-375参与调节小鼠胰岛β细胞的脂性凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	傅祖植	中山大学附属第二医院内分泌科	74	516	14.0	20.0
2	梁颖	中山大学附属第二医院内分泌科	46	252	9.0	14.0
3	李焱	中山大学附属第二医院内分泌科	119	779	13.0	25.0
4	严励	中山大学附属第二医院内分泌科	221	1598	19.0	30.0
5	许雪娟	中山大学附属第二医院内分泌科	4	8	2.0	2.0
6	刘珊英	中山大学附属第二医院内分泌科	22	113	5.0	10.0