FLT-1启动子在血管内皮细胞中特异生物活性的检测及其意义

• 作者: 吕智美 章涛 诸葛福媛 邓华聪 郑宏庭
• 来源期刊: 中国生物工程杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 启动子 FLT-1 载体构建 人脐静脉内皮细胞 基因治疗 血管疾病
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 7-11
• 页数: 5页
• 分类号: R54
• 语种: 中文

摘要

目的:构建带有组织特异性 FLT-1 启动子的真核表达栽体,检测其在转染的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中对荧光素酶报告基因表达的驱动能力.方法:采用PCR扩增FLT-1启动子,插入到pGL3-Basic-luc载体中,构建携带FLT-1启动子的真核表达载体pGL3-FLT-Basic-luc,经脂质体法转染HUVEC、HepG2、NIH3T3和HEK293 细胞,于转染48h后采用双荧光报告系统检测荧光素酶表达活性.结果:酶切及测序证实构建的pGL3-FLT-Basic-luc栽体中含有序列正确的FLT-1基因启动子,双荧光报告系统检测显示,转染的HUVEC细胞其荧光素酶活性明显高于HEK293细胞(P<0.01),而转染的HepG2和NIH3T3细胞中未检测出荧光素酶表达.结论:克隆的FLT-1启动子具有较高的血管内皮特异性转录活性,可作为血管疾病靶向基因治疗的启动子来源.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑宏庭	第三军医大学附属新桥医院内分泌科	62	279	9.0	13.0
2	邓华聪	重庆医科大学附属第一医院内分泌科	197	1595	19.0	31.0
3	章涛	遵义医学院附属医院贵州省细胞工程重点实验室	62	328	9.0	16.0
4	吕智美	重庆医科大学附属第一医院内分泌科	15	63	4.0	7.0
5	诸葛福媛	重庆医科大学附属第一医院内分泌科	5	11	2.0	3.0