副猪嗜血杆菌热休克蛋白70基因的序列分析及抗原性鉴定

• 作者: 姜平 张国龙 李军星 李玉峰 王先炜
• 来源期刊: 中国预防兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 副猪嗜血杆菌 HSP70 原核表达 抗原性
• 年，卷（期）: 2009,（7）
• 所属期刊栏目: 细菌及其病原生物学
• 页码范围: 519-523,539
• 页数: 6页
• 分类号: S852.617
• 字数: 4907字
• 语种: 中文

摘要

本研究利用简并引物首次从副猪嗜血杆菌基因组DNA中克隆获得全长HSP70基因(登录号:EU69-3116),基因测序结果表明HSP70完整阅读框1 908 bp,根据编码序列推导出相应635个氨基酸.经BLAST分析表明,其氨基酸序列与溶血性曼氏杆菌、杜克雷嗜血杆菌、胸膜肺炎放线杆菌等同源性最高,达到90%左右.将HSP70部分基因克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,经酶切鉴定正确后转化感受态大肠杆菌BL21,以异丙基硫代-B-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组蛋白.SDS-PAGE表明表达的重组蛋白约46 l(u,将表达的蛋白纯化后免疫小鼠,制备抗血清.Western blot结果显示该融合蛋白与副猪嗜血杆菌人工感染猪血清以及原核表达蛋白免疫的小鼠抗血清反应后有明显的特异性条带,证明该重组蛋白具有良好的抗原性,为HSP70功能研究奠定了重要基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李玉峰	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室	105	845	16.0	23.0
2	姜平	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室	186	1921	25.0	35.0
3	王先炜	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室	58	439	11.0	19.0
4	李军星	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室	5	34	3.0	5.0
5	张国龙	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室	3	6	1.0	2.0