副猪嗜血杆菌RfaF基因的原核表达及抗原性分析

• 作者: 任玉鹏 余远迪 冯晓辉 岳华 张斌
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 生物学
• 关键词: 副猪嗜血杆菌 RfaF基因 原核表达 抗原性
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 39-42
• 页数: 4页
• 分类号: Q789
• 字数: 3103字
• 语种: 中文

摘要

副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis)RfaF基因编码脂多糖庚糖基转移酶Ⅱ,参与了细菌的黏附入侵和抗血清中补体杀菌作用.为了进一步研究庚糖基转移酶Ⅱ的功能,用原核表达系统表达H.parasuis RfaF基因.用特异性引物扩增H.parasuis SC096株血清4型RfaF基因,得到一条1 053 bp的片段,将其连接到pET-32a(+)载体上,构建重组表达质粒,并将其转化至DH5α感受态细胞中,经酶切、PCR和测序进行鉴定.测序正确后,提取重组质粒,转化至E.coli BL21 (DE3)感受态细胞中,并用IPTG进行诱导.将诱导产物进行SDS-PAGE和Western blot分析.结果显示,H.parasuis RfaF基因可以在E.coli中表达,重组蛋白分子质量约为55 ku,与预期分子质量大小一致.Western blot分析表明,RfaF蛋白可以与H.parasuis血清4.型阳性高免血清产生特异性结合反应,具有良好的抗原性.本研究结果为深入探讨RafF基因的功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	岳华	西南民族大学生命科学与技术学院	187	1071	15.0	23.0
2	张斌	西南民族大学生命科学与技术学院	44	166	8.0	10.0
3	任玉鹏	西南民族大学生命科学与技术学院	20	70	4.0	8.0
4	冯晓辉	西南民族大学生命科学与技术学院	5	7	2.0	2.0
5	余远迪	西南民族大学生命科学与技术学院	4	17	2.0	4.0