肝片吸虫谷胱甘肽S-转移酶基因的克隆表达及活性分析

• 作者: 冉旭华 朴范泽 李晓娟 李树东 王春仁 闻晓波
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 肝片吸虫 谷胱甘肽S-转移酶基因 原核表达
• 年，卷（期）: 2009,（9）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 891-894
• 页数: 4页
• 分类号: R383.2
• 字数: 2876字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2009.09.014

摘要

目的 克隆和表达肝片吸虫谷胱甘肽S-转移酶基因(FhGST)以研究重组蛋白免疫学特性.方法 参考GenBank上发表的FhGST基因序列设计一对特异性引物,利用RT-PCR法扩增FhGST基因,将扩增产物克隆入pET-30a(+),构建重组表达载体.经PCR、双酶切和序列测定鉴定后转入E.coli BL21(DE3)宿主菌,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blotting对该重组蛋白进行分析和鉴定.结果 成功获得肝片吸虫GST基因全长为657bp的编码序列,SDS-PAGE结果表明重组蛋白分子量为31.3kDa,以包涵体形式表达.Western blotting结果证实重组蛋白能被其免疫的SD大鼠血清识别,表明其具有免疫原性;并且能与感染肝片吸虫的绒山羊血清发生反应,表明重组蛋白具有免疫反应性.结论 成功的克隆了肝片吸虫谷胱甘肽S-转移酶基因,实现了在原核表达系统中高效表达重组蛋白,并具有良好的免疫学活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王春仁	黑龙江八一农垦大学预防兽医学省重点实验室	125	282	7.0	10.0
2	冉旭华	黑龙江八一农垦大学预防兽医学省重点实验室	52	175	7.0	10.0
3	闻晓波	黑龙江八一农垦大学预防兽医学省重点实验室	59	191	7.0	11.0
4	朴范泽	黑龙江八一农垦大学预防兽医学省重点实验室	87	746	16.0	22.0
5	李晓娟	黑龙江八一农垦大学预防兽医学省重点实验室	5	15	3.0	3.0
6	李树东	黑龙江八一农垦大学预防兽医学省重点实验室	7	22	2.0	4.0