基因芯片技术直接检测常见腹泻病致病菌的应用研究

• 作者: 周骋 姚志建 曲芬 李跃旗 王全立 王军 程云 逄建涛
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 腹泻 聚合酶链反应 寡核苷酸序列分析
• 年，卷（期）: 2009,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1177-1180
• 页数: 4页
• 分类号: Q789
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0577-7402.2009.10.006

摘要

目的 探讨基因芯片技术在腹泻病粪便标本常见致病菌检测中的应用.方法 筛选7种常见腹泻病致病菌的特异基因作为检测目的 基因,分别为志贺菌ipaH基因、沙门菌hilA基因、副溶血弧菌tdh基因、空肠弯曲菌FlaA基因、肠出血性大肠埃希菌stxA2基因、肠产毒性大肠埃希菌st基因、霍乱弧菌ctxA2基因.设计相应的引物及探针,制备寡核苷酸芯片.对多重PCR扩增条件进行优化,将PCR扩增产物与带有7种特异探针的基因芯片杂交.检测标准菌株25株,模拟粪标本及临床腹泻病粪便标本64份.结果 经优化多重PCR扩增出7种腹泻病致病菌特异的致病基因片段,与基因芯片特异的探针杂交后.全部产生特异性杂交信号.标准菌株及模拟粪标本检测的阳性和阴性对照符合率均为100%.单一菌株最低检测量为10～100cfu/ml.64份腹泻病粪便标本检测出45份致病菌,其中33份志贺菌、12份副溶血弧菌,检出率为70.3%(45/64).粪培养检出 16份志贺菌,6份副溶血弧菌.检出率为34.4%(22/64),基因芯片法明显优于粪培养方法(P<0.01).结论 该基因芯片直接检测腹泻病致病菌,检出率高,达到了高效的检测目的 ,具有较好的实用性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王军	解放军第302医院门诊部	149	644	11.0	19.0
2	曲芬	解放军第302医院门诊部	64	481	14.0	20.0
3	程云	解放军第302医院门诊部	28	60	5.0	6.0
4	王全立	解放军第307医院输血科	14	26	4.0	4.0
5	李跃旗	解放军第302医院门诊部	20	87	6.0	9.0
6	逄建涛		1	0	0.0	0.0
7	姚志建		1	0	0.0	0.0
8	周骋		1	0	0.0	0.0