大鼠海马CA1脑区慢病毒载体注射方法学改进

• 作者: 刘路然 张惊宇 李金星 杨子超 杨安萍 赵虹
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 慢病毒载体 基因 海马 绿色荧光蛋白
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 826-828
• 页数: 3页
• 分类号: R37|R-332
• 语种: 中文

摘要

目的:采用电极埋管的改进方式进行大鼠海马CA1脑区慢病毒载体注射的方法,并检测此方法的有效性和安全性.方法:45只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组(SH)、生理盐水组(NS)和eGFP慢病毒注射组(eGFP),每组15只.所有实验大鼠在脑立体定位仪下定位海马CA1组织,采用电极埋管的改进方式进行慢病毒注射.NS组给予生理盐水(2 μL)、eGFP组给予慢病毒(2 μL),SH组只实行手术操作.注射病毒7、14和30 d后,分别处死大鼠并进行全脑冰冻切片,荧光显微镜观察eGFP慢病毒注射组的GFP绿色荧光表达水平和脑区分布.同时取相邻冰冻切片进行Nissl染色,检测eGFP慢病毒注射组的海马CA1脑区的损伤程度.结果:eGFP慢病毒注射成年大鼠海马CA1脑区7、14和30 d后,均可以成功检测到GFP在海马CA1脑区的表达,且表达水平和脑区分布均保持稳定,不随注射后切片时间的变化而变化.Nissl染色结果显示,神经元存活数目在eGFP慢病毒注射组与假手术组、生理盐水组比较均无显著性差异(P>0.05).结论:成功建立了电极埋管的方式向大鼠海马脑区注射慢病毒的方法,并可在海马CA1脑区高水平表达其所携带的目的基因,为进一步的在成年大鼠海马CA1脑区进行基因操作奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨子超	哈尔滨医科大学附属第四医院神经内科	30	95	6.0	8.0
2	张惊宇	哈尔滨医科大学附属第四医院神经内科	28	71	5.0	7.0
3	李金星	哈尔滨医科大学附属第四医院神经内科	4	4	1.0	1.0
4	赵虹	哈尔滨医科大学附属第四医院神经内科	25	47	4.0	6.0
5	刘路然	哈尔滨医科大学附属第四医院神经内科	13	110	7.0	10.0
6	杨安萍	哈尔滨医科大学附属第二医院皮肤科	6	11	2.0	3.0