应用RNA干扰抑制乙肝病毒X基因促HepG2细胞凋亡的作用

• 作者: 刘晓梅 史震 汤仁仙 甘宜敏 范宝峰 郑葵阳
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: HBX RNA干扰 凋亡 HepG2
• 年，卷（期）: 2009,（8）
• 所属期刊栏目: 肿瘤免疫学
• 页码范围: 699-703
• 页数: 5页
• 分类号: R737.11
• 字数: 3520字
• 语种: 中文

摘要

目的:构建靶向乙肝病毒X基因(HBX)的shRNA表达载体pSilencer3.1-shHBX,并应用其体外抑制HBX促HepG2细胞凋亡的作用.方法:设计并构建靶向HBX的shRNA表达载体pSilencer3.1-shHBX,脂质体转染法将HBX表达载体pcDNA3.1-HBX与pSilencer3.1-shHBX共转染人肝癌HepG2细胞,培养72小时后,分别以RT-PCR、Western blot和免疫荧光检测HBX的表达量.Annexin V-FITC/PI双染经流式细胞仪检测细胞的凋亡变化.结果:重组质粒pSilencer3.1-shHBX酶切鉴定和测序结果均与设计的一致.该质粒使HBX基因mRNA表达量降低了47.1%,进而使HBx蛋白表达量降低了58.9%,HBx蛋白荧光强度减弱,并使HBX 诱导的HepG2细胞凋亡率降低了52.11%.而阴性对照质粒无此作用.结论:成功构建靶向HBX shRNA表达载体pSilencer3.1-shHBX,并可应用其抑制HBX促HepG2细胞凋亡的作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘晓梅	徐州医学院病原生物与免疫教研室	25	62	5.0	6.0
2	郑葵阳	徐州医学院病原生物与免疫教研室	74	215	8.0	10.0
3	汤仁仙	徐州医学院病原生物与免疫教研室	74	220	8.0	11.0
4	范宝峰	徐州医学院病原生物与免疫教研室	6	8	1.0	2.0
5	史震	徐州医学院病原生物与免疫教研室	14	33	3.0	5.0
6	甘宜敏	徐州医学院病原生物与免疫教研室	5	3	1.0	1.0