禽传染性支气管炎病毒M基因在毕赤酵母中表达与蛋白反应活性检测

• 作者: 廖娟 张毅 王红宁 田浪
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 禽传染性支气管炎病毒 M基因 毕赤酵母 分泌表达 活性检测
• 年，卷（期）: 2009,（11）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 1373-1376,1381
• 分类号: S852.65
• 语种: 中文

摘要

将禽传染性支气管炎病毒(IBV)M基因克隆到毕赤巴斯德表达载体pPIC9K中,构建了重组表达载体pPIC9K-M,电击转化毕赤巴斯德酵母GS115,经MD和MM平板筛选和PCR鉴定后,采用G418抗性梯度筛选得到高拷贝重组菌株GS115/pPIC9K-M His~+Mut~+,重组菌株用1%的甲醇诱导分泌表达,并对表达产物进行SDS-PAGE、Western-blot分析.结果表明,IBV M基因在毕赤酵母中成功获得了表达,表达蛋白的相对分子质量约为33 000,能与IBV阳性血清特异性结合.将表达蛋白初步纯化后作为包被抗原,ELISA检测结果显示表达蛋白与特异性抗体反应良好,表明表达的M蛋白生物学活性良好.本研究表达的IBV M蛋白可作为制备IB诊断抗原的基础材料,对IB的防治有重要理论和实用价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王红宁		3	15	2.0	3.0
2	廖娟	四川农业大学动物医学院	7	66	5.0	7.0
4	田浪	四川农业大学动物医学院	9	76	5.0	8.0
5	张毅		2	9	2.0	2.0