不同破壁方法提取真菌DNA的比较

• 作者: 史利宁 周万青 李芳秋 王立魁 邵海枫
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 真菌 DNA 提取 PCR
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 所属期刊栏目: 研究生园地
• 页码范围: 212-214
• 页数: 3页
• 分类号: R446.6
• 语种: 中文

摘要

目的 探索和评价提取致病性真菌DNA的简便方法.方法 分别用6种方法(液氮冻融、-70℃冻融、溶胞酶消解、超声破碎、高盐溶液、尿素溶液)裂解真菌细胞壁,再用市售Dneasy Blood &Tissue Kit试剂盒提取DNA,最后通过对提取物进行比色定量和PCR检测评价各种提取方法的优弊.结果 酶消解破壁法提取真菌DNA效率最高,重复性良好.模拟全血标本中白色念珠菌检测限为102个孢子,烟曲霉及新型隐球菌检测限为103个孢子.结论 酶消解破壁法提取真菌DNA在6种方法中效率最高,可用于临床常见真菌感染的PCR快速诊断.