用疏水色谱法复性并同时纯化重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子

• 作者: 刘建波 古元梓 张尼 王欢 白泉
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 疏水色谱 重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 复性 纯化
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 548-551
• 页数: 4页
• 分类号: Q503
• 字数: 4021字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2009.04.027

摘要

目的:建立一种简单、快速复性并同时纯化大肠杆菌表达的重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)的方法.方法:研究rhGM-CSF在疏水色谱(HIC)上的复性和纯化机理,并对固定相和流动相进行选择和优化.包括固定相配基、流动相中盐的种类、流动相pH值、流动相中还原型谷胱甘肽(GSH)和氯化型谷胱甘肽(GSSG)的比例.以及流动相中尿素的浓度.结果:优化后的固定相为PEG600,流动相中的盐为(NH4)2SO4,流动相pH值为7.0,流动相中添加2.0 mol/L尿素、1.8 mmal/L GSH和0.3 mmol/L GSSG.在优化条件下,HIC可使rhCM-CSF在分离纯化的同时得到复性,比活达1.58x107U/mg,纯度为95.7%,质量回收率为56.8%.结论:建立的疏水色谱复性和纯化工艺可简化操作步骤,缩短生产周期.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张尼		6	20	2.0	4.0