基因Ⅳ型猪戊型肝炎病毒重组ORF3蛋白抗原间接ELISA诊断方法的建立

• 作者: 刘涛 崔克 成鹰 杜丽 林杰材 满初日嘎 王凤阳 王轶 陈品林 雷明
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪戊型肝炎病毒 ORF3 原核表达 间接酶联免疫吸附试验
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 310-315
• 页数: 6页
• 分类号: S852.659.6|R446.61
• 字数: 5999字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2009.04.006

摘要

为建立检测猪戊型肝炎病毒(HEV)抗体的间接ELISA诊断方法,将HEV ORF3片段克隆至大肠杆菌表达载体pET42a(+)中,构建了原核表达载体pET42a-ORF3,将其转化大肠杆菌BL21(DE3),以IPTG诱导表达,并对表达的融合蛋白进行Ni2+-NTA柱纯化及SDS-PAGE、Western-blot鉴定,用纯化的融合蛋白作为包被抗原建立了间接ELISA检测方法.结果显示,GST-ORF3在大肠杆菌BL21(DE3)中获得了高效表达,表达的蛋白质分子质量约为45.5 ku,具有良好的抗原性.用建立的间接ELISA检测190份猪血清样品,阳性率为84.7%,与试剂盒检测结果相比,阳性符合率为91.5%.表明,建立的间接ELISA方法具有较好的特异性和灵敏性,可用于猪血清HEV抗体的检测.