钝顶螺旋藻表达载体p215t-spp的构建及转化

• 作者: 叶霁 唐欣昀 张海生 曹媛媛 王芬 甘旭华
• 来源期刊: 激光生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 钝顶螺旋藻 启动子 gfp基因 PEG转化 转化率
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 12-16
• 页数: 5页
• 分类号: Q943.1
• 字数: 3766字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7146.2009.01.003

摘要

用合适的限制性内切酶消化载体p215t,胶回收获得含有gfp基因及amp基因大片段.设计引物,采用PCR扩增无菌钝顶螺旋藻A9藻株的强启动子片段;在T4连接酶的作用下进行体外连接重组,构建了带有螺旋藻启动子和gfp报告基因的新型表达载体p215t-spp.将该载体转入钝顶螺旋藻,利用报告基因的表达,在荧光显微镜下观察并记录转化藻细胞,p215t-spp质粒显著提高转化率.研究了不同PEG浓度、转化时间及冰浴处理对转化率的影响.采用1%PEG能有效促进细胞吸收DNA,获得10.5‰的转化率.实验初步证明,带有螺旋藻启动子的报告基因gfp能够在钝顶螺旋藻中顺利表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	唐欣昀	安徽农业大学生命科学学院	80	887	16.0	24.0
2	甘旭华	安徽农业大学生命科学学院	22	399	12.0	19.0
3	曹媛媛	安徽农业大学生命科学学院	28	253	10.0	15.0
4	叶霁	安徽农业大学生命科学学院	6	68	3.0	6.0
5	张海生	安徽农业大学生命科学学院	4	16	3.0	4.0
6	王芬	安徽农业大学生命科学学院	2	11	2.0	2.0