西伯利亚蓼Tau类谷胱甘肽转移酶基因的克隆与表达分析

• 作者: 刘关君 刘昌财 刘明坤 刘桂丰 杨传平 阎秀峰 魏志刚
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 西伯利亚蓼 谷胱甘肽转移酶 基因克隆 RT-PCR 表达分析
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 98-106
• 页数: 9页
• 分类号: S188
• 字数: 5338字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2009.01.017

摘要

用RACE技术从两伯利亚蓼(Polygonum sibiricum Laxm.)中克隆了谷胱甘肽转移酶(PsGSTU1)基因完整编码区cDNA序列,长度669 bp,编码222个氨基酸.经与谷胱甘肽转移酶家族其它成员的氨基酸序列比对和系统进化分析,初步确定PsGSTU1属于谷胱甘肽转移酶Tau家族.利用荧光定量RT-PCR分析表明,PsGSTU1在西伯利亚蓼的叶、茎和地下茎中均有表达,茎中表达量最高,叶和地下茎次之;3%NaHCO3胁迫后,此基因在叶和茎中的最大表达量出现在胁迫后48 h,而茎在72 h;去胁迫后,此基因在不同部位的表达量表现为:地下茎叶茎.将PsGSTU1完整的eDNA片段连接至pET28a质粒以构建原核表达载体,并导人大肠杆菌(Escherichia coil),经IPTG诱导后表达了分子量为26 kD的目的蛋白,表达PsGSTU1的大肠杆菌显著提高了耐受NaHCO2胁迫的能力.