牛霉形体PCR检测方法的建立

• 作者: 姜海芳 张美晶 曹培丽 李媛 董惠 辛九庆 郭丹 陈超
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 牛霉形体 牛传染性胸膜肺炎 聚合酶链式反应
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 416-420
• 页数: 5页
• 分类号: S852.62:Q503
• 字数: 3298字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2009.05.008

摘要

参考GenBank中牛霉形体和无乳霉形体P81基因的序列差异,设计了针对牛霉形体P81基因的PCR引物,建立了牛霉形体PCR检测方法.并对该方法进行了敏感性和特异性试验.该方法可以从100ccu/mL(ccu:color change unit,颜色变化单位)的牛霉形体培养物中检出目的片段;经对丝状霉形体丝状亚种SC型(MmmSC)PG1株、丝状霉形体丝状亚种LC型(MmmLC)Y-goat株、山羊霉形体山羊亚种(Mccp)87001株、无乳霉形体(M.agalactiae)PG2株、绵羊肺炎霉形体Y-98株等亲缘关系相近的霉形体纯培养物检测,结果证实该方法具有良好的特异性.利用建立的PCR检测方法可以从人工感染牛的鼻拭子和临床发病牛肺中扩增出目的片段,与分离培养结果完全符合,本方法为国内首次建立的敏感、特异、快速的牛霉形体PCR检测方法.